Kultivácia je mikrobiologický test, ktorého účelom je odhaliť a identifikovať mikroorganizmy v krvi, moči, stolici alebo inom biologickom materiáli. Očkovanie je viacstupňový proces a vykonáva sa len v odôvodnených prípadoch. Skontrolujte, aké sú indikácie na kultiváciu a čoho sa test týka.

Kultúraažmikrobiologický testvykonaný na detekciu a identifikáciu patogénov vo vzorkách biologického materiálu

Vzhľadom na typ testovaných patogénov sa rozlišujebakteriologická kultúra(bakteriologický test) amykologická kultúra(mykologický test).

Vzhľadom na typ biologického materiálu existujekultúr krvi , moču, výkalov, spermy, spúta alebo vaginálneho výtoku. Biologickým materiálom môže byť aj mozgovomiechový mok, výtery z hrdla, ucha, nosa, ústnej sliznice a dokonca aj zo spojovkových vakov očí, z pustúl a iných kožných lézií, ako aj z rán, fistúl či abscesov atď.

Kultúra - indikácie pre test

Kultivácia sa vykonáva pri podozrení na infekciu, t. j. keď sa u pacienta objavia symptómy. Napríklad indikáciou na kultiváciu moču budú príznaky infekcie močových ciest, ako je bolesť krížov alebo časté a bolestivé močenie.

Na infekciu krvi môže byť podozrenie, keď sa objaví horúčka a zimnica, zrýchlené dýchanie a srdcová frekvencia, pokles krvného tlaku, poruchy vedomia alebo oligúria. Kultivácia stolice sa však vykonáva u pacienta, ktorý má hnačku, brušné kŕče a/alebo krv alebo hlien v stolici.

Kultivácia moču a pošvového výtoku by sa mala vykonávať u tehotných žien - dokonca aj pri absencii symptómov infekcie - aby sa vylúčila prítomnosť mikroorganizmov, ktoré môžu predstavovať hrozbu pre dieťa.

Kultivácia - zber biologického materiálu

Najprv musíte správne odobrať vzorku biologického materiálu. Pre krvné kultúry sa musia odobrať aspoň dve vzorky krvi z dvoch rôznych žíl do dvoch skúmaviek obsahujúcich dva typy kultivačného média (schopného detekovať aeróbne aj anaeróbne baktérie).

Biologický materiál z vagíny sa odoberá špeciálnym tampónom - jeden tampón sa odoberie zpredsiene vagíny a druhé okolo konečníka. Potom sa tampóny tiež umiestnia na špeciálny substrát (tzv. transportný substrát). Na druhej strane sa kultivácia moču robí z prvej vzorky, moču po noci (vtedy je počet baktérií najvyšší), ktorý sa odoberá do sterilnej nádobky pomocou tzv. stredný prúd.

Dôležité

Pred očkovaním povedzte svojmu lekárovi o všetkých liekoch, ktoré užívate (najmä antibiotiká a lieky ovplyvňujúce zrážanlivosť krvi), zdravotných problémoch a možných nosičoch krvou prenosných patogénov (napr. HBV, HCV, HIV).

Kultivácia – aký je test?

1. FÁZA – VÝSIEVANIE

Prvou fázou je výsev biologického materiálu, t.j. nanesenie vzorky materiálu na tzv. kultivačné médium (mikrobiologické). Ide o zmes starostlivo vybraných živín, ktoré umožňujú rast a množenie mikroorganizmov. Rastové médiá obohatené krvou sa najčastejšie používajú, pretože poskytujú optimálne podmienky pre rast väčšiny druhov patogénov.

Očkovanie je možné vykonať niekoľkými spôsobmi: na tekuté médium, na šikmý agar, ale najčastejšie sa vykonáva na Petriho miskách (je to laboratórna nádoba, valcový stojan so širokým plochým dnom) t.j. kúsok testovaného materiálu je rozprestretý cik-cak alebo radiálne po celej ploche substrátu, alebo sú rozdelené na sektory a materiál je na ne rozprestretý

očkovanie sa zvyčajne vykonáva v laminárnej komore, čo umožňuje udržiavať aseptické podmienky. Komora chráni pred vniknutím baktérií alebo spór húb, ktoré neustále plávajú vo vzduchu mimo komory.

Tak je to napríklad v prípade kultivácie moču. V prípade hemokultúry sa tento krok vynechá, pretože médium sa vloží do sterilných fliaš alebo skúmaviek, do ktorých sa priamo odoberá krv. Podobne je to aj v prípade výterov, ktoré sa hneď po odbere vložia na špeciálne médium a ihneď sú určené na chov

2. ETAPA - CHOV

Vzorka sa po nanesení na substrát umiestni do inkubátora, kde teplota zodpovedá teplote ľudského tela. Toto sú podmienky, ktoré vedú k množeniu mikroorganizmov. Stimuláciu rastu požadovaných mikroorganizmov možno dosiahnuť aj výberom vhodného pH a okysličovania. Kultivácia patogénov trvá od 24-48 hodín (niektoré druhy baktérií) až po niekoľko desiatok dní (niektoré huby).

KROK 3 – IZOLÁCIA

Cieľom tejto fázy je izolovať konkrétny druh patogénu. V prípade izolácie mikroorganizmovvytvorí sa bakteriálna suspenzia so špecifickou hustotou, ktorá sa použije na identifikáciu a určenie liekovej citlivosti kmeňa

KROK 4 – IDENTIFIKÁCIA

V súčasnosti sa na identifikáciu mikroorganizmov používajú biochemické, manuálne alebo automatické testy. Príkladom biochemického testu je test API. Spočíva v zavedení bakteriálnej suspenzie do každej mikroskúmavky, ktorá je súčasťou súpravy. Ďalšou fázou je kultivácia mikroorganizmov pri správnej teplote. Biochemické reakcie, ktoré prebiehajú počas tejto doby, spôsobia zmeny farby, buď spontánne, alebo po pridaní indikátorového činidla. Na čítanie sa používa číselník alebo špeciálny počítačový program.

Mikrobiologická diagnostika je doplnená o mikroskopický preparát, ktorý umožňuje pozorovanie buniek patogénu po ich predchádzajúcom zafarbení

5. KROK – ANTIBIOGRAM

Po dokončení očkovania sa vykoná antibiogram na posúdenie citlivosti patogénu na liek. Mikrobiológ umiestni disky s antibiotikami špecifických koncentrácií na vhodný substrát s aplikovanou bakteriálnou suspenziou (tzv. antibiogram). Hodnoty antibiogramu sa robia meraním veľkosti zón inhibície rastu okolo diskov obsahujúcich antibiotikum.

Na základe výsledkov mikrobiologického vyšetrenia a antibiogramu lekár rozhodne o vhodnej liečbe

Kategórie:

Výskum