Prietoková cytometria je diagnostická a výskumná technika známa už mnoho rokov a široko používaná v onkológii. Prietoková cytometria umožňuje vyšetrenie buniek, ktoré tvoria suspenziu v laminárnom alebo stratifikovanom prúde kvapaliny, pomocou zariadenia nazývaného prietokový cytometer. Aké sú indikácie pre prietokovú cytometriu a ako sa to robí?

Prietoková cytometriasa používa v diagnostike hematologických novotvarov, pretože ide o tekuté nádory, ale je to len pomocná metóda. Je však potrebné pripomenúť, že existuje jedna rakovina, ktorú možno diagnostikovať iba touto metódou. Toto je chronická lymfocytová leukémia.

Pri iných neoplastických ochoreniach sa prietoková cytometria používa ako diagnostická pomôcka, pretože ukazuje veľmi dôležité vlastnosti neoplastických buniek. Táto metóda sa používa aj na hodnotenie účinnosti aplikovanej liečby.

Prietoková cytometria – čo ukazuje?

Prúd kvapaliny obsahujúci testované častice prúdi konštantnou rýchlosťou (100-2000 častíc za sekundu) cez meraciu oblasť cytometra. Tu sa využívajú optické metódy na analýzu tvarov, rozmerov, vnútornej štruktúry buniek a ich obsahu, napr. DNA. Všetky bunky sú opticky označené

Na meranie sa využívajú vlastnosti rozptylu laserového svetla jednotlivými bunkami alebo ich zložkami (jadrá, chromozómy, mitochondrie) alebo nimi indukovaná fluorescencia

Optické signály sú konvertované na elektrické signály, ktoré sú po analýze graficky prezentované vo forme mono- alebo biparametrických rozdelení.

Cytometer umožňuje aj segregáciu častíc po opustení meracej zóny. Dá sa povedať, že prístroj usporiada (segreguje) bunky s rovnakými základnými prvkami (preparatívne triedenie) alebo extrahuje špecifické typy buniek (analytické triedenie).

Prietoková cytometria umožňuje štúdium populačných charakteristík buniek, analýzu bunkových komponentov (najmä ako sú nukleové kyseliny, proteíny, povrchové a bunkové antigény), enzymatickú aktivitu, membránový potenciál, mitochondriálnu aktivitu, vnútrobunkové pH, transport iónov a tekutosť membrány.

Prietoková cytometria - aplikácia

Používa sa pri diagnostikeprietoková cytometria umožňuje určiť fenotyp neoplastických buniek a expresiu jednotlivých proteínov. Na dosiahnutie tohto cieľa sa používajú značené fluorescenčné protilátky, ktoré sa charakteristickým spôsobom viažu na antigény na povrchu bunkovej membrány. Vďaka tomu je možné určiť stupeň ich diferenciácie, pôvod, prognostické a terapeutické markery, ktoré uľahčujú rozhodovanie o ďalšom diagnostickom a liečebnom postupe

Ďalšou aplikáciou prietokovej cytometrie je sledovanie účinnosti aplikovanej liečby hodnotením tzv. „reziduálna choroba“, čo je percento buniek s fenotypmi podobnými nádoru, ktoré zostanú po liečbe.

Prietoková cytometria tiež uľahčuje výskum rakoviny. Vďaka tejto metóde je možné vyhľadávať napríklad receptory, ktoré sú na povrchu neoplastických buniek a môžu sa stať cieľom liečby

Metóda umožňuje vyhodnotiť aktivitu proteínov vo vnútri bunky. Je tiež možné posúdiť bunkový cyklus, napr. stanovením množstva DNA v bunke.

V priebehu proliferácie bunka prechádza fázami bunkového cyklu, v ktorých zdvojnásobuje množstvo DNA. Posúdením tohto množstva je možné určiť, v akej fáze sa bunky nachádzajú, či proliferujú alebo nie, alebo či prechádzajú do apoptózy. Inými slovami, pomocou prietokovej cytometrie môžete zistiť, či sa bunky pripravujú na apoptózu, čo je proces programovanej smrti.

Prietoková cytometria – budúcnosť

Prietoková cytometria je známa a používaná v medicíne už niekoľko desiatok rokov. Neustále sa však zdokonaľuje a vytvára nové diagnostické a výskumné možnosti. V prvom období používania tejto metódy bolo možné určiť iba veľkosť a stupeň zrnitosti buniek.

Použitie laserového svetla v prístrojoch prietokovej cytometrie vám umožňuje excitovať určité fluorescenčné markery a následne vyhodnotiť ich emisiu. Moderné cytometre umožňujú výrazné zvýšenie počtu markerov, ktoré sú hodnotené naraz, čo sa jednoznačne premieta do zvýšenia citlivosti tejto metódy.

Preto sa používa nielen na diagnostiku nádorových ochorení, ale aj na hodnotenie účinnosti liečby.

O autoroviAnna JaroszováNovinár, ktorý sa už vyše 40 rokov venuje popularizácii zdravotnej výchovy. Víťaz mnohých súťaží pre novinárov zaoberajúcich sa medicínou a zdravím. Dostala okrem iného Ocenenie dôvery „Zlatý OTIS“ v kategórii „Médiá a zdravie“, sv. Kamila ocenená pri príležitostiSvetový deň chorých, dvakrát „Krištáľové pero“ v celoštátnej súťaži pre novinárov propagujúcich zdravie a mnohé ocenenia a vyznamenania v súťažiach o „Zdravotnícky novinár roka“, ktoré organizuje Poľská asociácia novinárov pre zdravie.

Prečítajte si ďalšie články tohto autora

Kategórie:

Výskum