Lymphocyte Transformation Test (LTT) bol vyvinutý v 60. rokoch 20. storočia a primárne sa používa v diagnostike alergie. LTT test bol použitý aj pri diagnostike chronických infekcií Borrelia burgdorferi, ktorá je príčinou lymskej boreliózy. Test je dôležitý najmä vtedy, keď sú ťažkosti s diagnostikou ochorenia. Čo je test LTT a ako interpretovať jeho výsledky?

Obsah:

  1. Test transformácie lymfocytov (LTT) – aplikácia
  2. Test transformácie lymfocytov (LTT) – Lymská borelióza
  3. Test transformácie lymfocytov (LTT) – o čo ide?
  4. Test transformácie lymfocytov (LTT) – výsledky

Test transformácie lymfocytov( LTT ) bol prvýkrát popísaný v roku 1960.

Test sa v súčasnosti používa vo výskume a ako diagnostický nástroj v rôznych oblastiach medicíny, najmä v alergológii.

Test transformácie lymfocytov (LTT) – aplikácia

test LTT bol použitý v:

  • hodnotenie porúch imunitného systému, napr. tých, ktoré sa prejavujú zvýšenou náchylnosťou na infekcie
  • diagnostika chronických bakteriálnych (Borrelia, Chlamydia, Yersinia), protozoálnych (Giardia lamblia) a vírusových (herpes vírus) infekcií
  • diagnóza precitlivenosti typu IV (alergia) v závislosti od T lymfocytov na lieky, kovy, potravinové prísady, plesne, potraviny (napr. lepok); LTT test sa používa najmä na detekciu alergií na zubné materiály, ako sú zubné protézy alebo výplne

Test transformácie lymfocytov (LTT) – Lymská borelióza

Diagnostické ťažkosti súvisiace s diagnózou lymskej boreliózy nútia špecialistov hľadať iné ako odporúčané laboratórne testy. Jedným z nich je test LTT. Predpokladá sa, že test LTT môže byť užitočný pri:

  • potvrdenie aktívnej infekcie u ľudí s pozitívnymi výsledkami sérologických testov, ale bez príznakov indikujúcich lymskú boreliózu
  • potvrdenie aktívnej infekcie u ľudí s negatívnymi alebo hraničnými výsledkami v sérologických testoch, ale s klinickými príznakmi lymskej boreliózy
  • sledovanie účinnosti antibiotickej liečby
  • Hodnotenie recidívy Lyme

Mali by ste všakupozorňujeme, že test LTT nie je odporúčaným testom pri diagnostike lymskej boreliózy Národnou komorou laboratórnych diagnostikov, Štátnym zdravotným ústavom a Národným konzultantom v oblasti infekčných chorôb, pretože tento test ešte vyžaduje validáciu (t.j. potvrdenie jeho dôveryhodnosti) v tejto chorobnej entite.

  • Lymská borelióza – výskum boreliózy. Má test začiarknutia zmysel?

Test transformácie lymfocytov (LTT) – o čo ide?

Test je založený na hodnotení reaktivity buniek imunitného systému (T lymfocytov imunitnej pamäte) na testovaný antigén/alergén, napr. liek, bakteriálny proteín. Imunitné bunky reagujú na daný antigén/alergén po predchádzajúcom kontakte s ním (odtiaľ názov T-bunky imunitnej pamäte).

Pre test LTT sa bunky získavajú z pacientovej periférnej krvi odobranej zo žily. Potom sa v laboratóriu z krvi oddelia jednotlivé bunkové frakcie, konkrétne mononukleárne bunky (lymfocyty a monocyty).

Izolované bunky sa potom pestujú za vhodných podmienok a potom sa stimulujú špecifickým antigénom/alergénom. Ak s ním boli bunky v kontakte, začnú sa deliť a potom sa meria intenzita týchto delení.

Jednotlivé modifikácie LTT merajú koncový bod bunkového delenia rôznymi spôsobmi a možno ich posúdiť nepriamo meraním:

  • produkcia signálnych molekúl ako interferón-gama (INF-γ), ktoré vznikajú delením buniek; iný názov tejto modifikácie LTT testu je EliSpot
  • aktivita receptora na povrchu deliacich sa buniek, napr.CD25, CD69, HLA-DR
  • množstvo DNA vygenerovanej počas fázy syntézy, ktoré sa vyskytuje len v antigénom/alergénom stimulovaných deliacich sa T lymfocytoch; na tento účel sa novosyntetizované reťazce DNA označia napríklad 3H-tymidínom, ktorý sa potom deteguje špeciálnym čítačom

Test sa vykonáva v troch alebo štyroch opakovaniach, aby sa zvýšila spoľahlivosť získaného výsledku.

Stojí za to vedieť

LTT test je veľmi náročný laboratórny test. Vyžaduje si to drahé a moderné laboratórne vybavenie a skúsenosti personálu vykonávajúceho test.

Vzhľadom na túto skutočnosť by sa test mal vykonávať iba v centrách, ktoré majú skúsenosti s vykonávaním testu LTT.

Test transformácie lymfocytov (LTT) – výsledky

Pozitívny výsledok testu LTT indikuje prítomnosť imunitných pamäťových T buniek v krvi, ktoré boli predtým v kontakte s testovaným antigénom/alergénom. Čo môže naznačovať príčinný vzťah -vplyv medzi skúmaným faktorom a symptómami pacienta

Výsledok testu ukazuje číselné hodnoty vyjadrené ako stimulačný index (SI). SI vyjadruje intenzitu delenia imunitných buniek vo vzťahu k negatívnej kontrole, čo sú v tomto prípade imunitné bunky, ktoré neboli stimulované antigénom/alergénom.

Skóre SI menšie ako 1 je negatívne, skóre medzi 2 a 3 je slabo pozitívne (hraničné) a skóre vyššie ako 3 je pozitívne.

Dôležité

Aké faktory môžu ovplyvniť výsledok LTT?

Užívanie liekov, ktoré potláčajú imunitný systém, ako sú steroidy (metotrexát, prednizón), môže znížiť schopnosť delenia buniek v bunkovej kultúre a/alebo produkciu cytokínov bunkami.

Referencie

  1. https: //www.xenodiagnostics.com/lymphocyte-transformation-test.html
  2. Pichler W.J a Tilch J. Test transformácie lymfocytov v diagnostike precitlivenosti na lieky. Alergia. 2004 august; 59 (8): 809-20.
  3. Rychlik U. et al Laboratórna diagnostika testu na transformáciu lymfocytov (LTT). Journal of Laboratory Diagnostics 2013, 49 (4); 425-428.
  4. Laboratórna diagnostika chorôb prenášaných kliešťami Odporúčania pracovnej skupiny: Národná komora laboratórnych diagnostikov, Štátny ústav verejného zdravotníctva-Národný ústav hygieny, Národný konzultant v oblasti infekčných chorôb, Oddelenie infektológie a neuroinfekcií , Lekárska univerzita v Białystoku, Poľská virologická spoločnosť, Varšava 2014.
Karolina Karabin, MD, PhD, molekulárna biologička, laboratórna diagnostika, Cambridge Diagnostics PolskaPovolaním biológ so špecializáciou na mikrobiológiu a laboratórny diagnostik s viac ako 10-ročnou praxou v laboratórnych prácach. Absolvent Vysokej školy molekulárnej medicíny a člen Poľskej spoločnosti humánnej genetiky Vedúci výskumných grantov v Laboratóriu molekulárnej diagnostiky na Katedre hematológie, onkológie a vnútorných chorôb Lekárskej univerzity vo Varšave. Titul doktora lekárskych vied v odbore lekárska biológia obhájila na 1. lekárskej fakulte Lekárskej univerzity vo Varšave. Autor mnohých vedeckých a populárno-náučných prác z oblasti laboratórnej diagnostiky, molekulárnej biológie a výživy. Denne ako špecialista v oblasti laboratórnej diagnostiky vedie obsahové oddelenie v Cambridge Diagnostics Polska a spolupracuje s tímom nutričných špecialistov na CD Dietary Clinic. Svoje praktické poznatky z diagnostiky a diétnej terapie chorôb zdieľa s odborníkmi na konferenciách, školeniach, v časopisoch a na webových stránkach. Predovšetkýmzaujímal sa o vplyv moderného životného štýlu na molekulárne procesy v organizme.

Kategórie:

Výskum