- Čo je koronavírus a ako prebieha infekcia?
- Testy na koronavírus – ktorý laboratórny test si mám vybrať?
- Testy na koronavírus – Molekulárne testovanie
- Testy na koronavírus – Imunotest
- Testy na koronavírus – rýchle diagnostické testy
- Testy na koronavírus – ako vyzerá zber výskumného materiálu?
- Testy na koronavírus – kto by mal test robiť?
- Testy na koronavírus – ako interpretovať výsledky imunologických testov?
- Testy na koronavírus – ako interpretovať výsledky molekulárnych testov?
- Testy na koronavírus – kde sa to dá urobiť?
Pomôžte rozvoju stránky a zdieľajte článok s priateľmi!
Počas pandémie koronavírusu SARS-CoV-2 je kľúčom k regulácii šírenia infekcie včasná a spoľahlivá diagnostika. Na tento účel sa používajú diagnostické testy, najmä molekulárne a imunologické testy. Zároveň sú na trhu stále viac dostupné rýchle kazetové testy na koronavírus. Ktoré testy na koronavírus si mám vybrať a sú všetky spoľahlivé?
Testy na koronavírussú potrebné na určenie infekcie koronavírusom SARS-CoV-2. Príznaky infekcie nie sú jednoznačné a niekedy sa ani neobjavia. Preto sa na diagnostiku využívajú testy – väčšinou molekulárne a imunologické, aj keď existujú aj kazetové testy.
Čo je koronavírus a ako prebieha infekcia?
Ťažký akútny respiračný syndróm koronavírus 2 (SARS-CoV-2) je nový vírus, ktorý spôsobuje ochorenie COVID-19. SARS-CoV-2 patrí do rodiny koronavírusov, ktorá zahŕňa aj vírusy SARS-CoV a MERS-CoV. Koronavírus SARS-CoV-2 bol identifikovaný začiatkom januára 2022 ako príčina epidémie zápalu pľúc v čínskom Wu-chane. Potom, čo sa v Číne nakazili a zabili tisíce ľudí, koronavírus sa rozšíril po celom svete a spôsobil pandémiu.
K prenosu koronavírusu z človeka na človeka dochádza kvapôčkami pri tesnom kontakte a cez povrchy kontaminované sekrétom chorého človeka. Hygiena rúk je preto nevyhnutná pri prevencii infekcie koronavírusom.
Hlavné príznaky infekcie sú:
- horúčka nad 38 °C,
- kašeľ,
- únava,
- dýchavičnosť,
- a bolesť hrdla,
- bolesť hlavy,
- konjunktivitída,
- strata chuti a vône
- a gastrointestinálne problémy.
Symptómy sa objavia do 14 dní po vystavení koronavírusu. Vo väčšine prípadov (97,5 %) však začnú do 11 dní.
Na tomto mieste však treba zdôrazniť, že symptómy koronavírusovej infekcie sa u každého človeka líšia, od asymptomatickej infekcie až po ťažké respiračné zlyhanie a tzv. cytokínová búrka. Posledne menované sú obzvlášť zraniteľné voči ľuďom z vysoko rizikových skupín, ako sú starší ľudia alebo choríkoexistujúce (diabetes a kardiovaskulárne ochorenia).
Talianska kohortová štúdia vykonaná v meste Vó Euganeo Dr. Lavezzom a kolegami zistila, že 50 – 75 % ľudí s pozitívnym testom na výtery z hrdla zostáva asymptomatických, zatiaľ čo u iných sa objavia mierne príznaky podobné chrípke. Naproti tomu iba 10 % všetkých symptomatických pacientov má závažnejšie prejavy infekcie.
Testy na koronavírus – ktorý laboratórny test si mám vybrať?
Na stanovenie infekcie koronavírusom SARS-CoV-2 je potrebné vykonať špecializované laboratórne testy, pretože len na základe klinických príznakov to nie je možné. V súčasnosti sa používajú dva typy laboratórnych testov na koronavírus:
- molekulárne (genetické) testy
- imunologické testy (sérologické alebo antigénne)
Upozorňujeme, že diagnostická hodnota vyššie uvedených testov sa môže líšiť.
Testy na koronavírus – Zhrnutie testov na koronavírus [TABUĽKA]
| Molekulárne (genetické) testy | Imunologické (sérologické) testy | Testy kaziet | |
| Metóda výskumu | RT-PCR v reálnom čase | imunoenzymatické alebo imunochemické metódy | imunochromatografické metódy |
| Testovací materiál | výter z hrdla alebo nosohltanu | venózna krv | kapilárna krv odobratá z prsta |
| Čo sa zisťuje? | genetický materiál vírusu - RNA | IgM, IgA alebo IgG protilátky proti vírusu | IgM, IgA alebo IgG protilátky proti vírusu |
| Hlavný účel štúdie | potvrdenie aktívnej infekcie | potvrdenie infekcie | potvrdenie infekcie |
| Miesto vykonania | laboratórium | laboratórium | domov alebo lekárska stanica |
| Cena testu | 450 – 500 PLN | 100 – 220 PLN | 30 – 60 PLN |
| Čas čakať na výsledok | do 3 dní | do 3 dní | od niekoľkých minút do 1 dňa |
Testy na koronavírus – Molekulárne testovanie
Molekulárne testy založené na reverznej transkripčnej polymerázovej reťazovej reakcii (RT-PCR) v reálnom čase sú jediné, ktoré Svetová zdravotnícka organizácia odporúčapotvrdiť aktívnu infekciu koronavírusom.
Testy založené na RT-PCR v reálnom čase sa spoliehajú na viacnásobnú replikáciu v niekoľkých desiatkach cyklov špecifického fragmentu genetického materiálu koronavírusu, teda RNA. Na tento účel sa používa enzým nazývaný polymeráza a špecifické páry primerov, ktoré zodpovedajú danému fragmentu RNA vírusu. V prípade koronavírusu SARS-CoV-2 je to napríklad fragment kódujúci nukleokapsidový (N) alebo obalový (E) proteín.
Ďalšou fázou diagnostického procesu je vizualizácia namnoženého fragmentu genetického materiálu pomocou špeciálnych fluorescenčných farbív. RT-PCR v reálnom čase je vďaka amplifikácii špecifických fragmentov vírusového genetického materiálu a použitiu fluorescenčných farbív ultracitlivou metódou v porovnaní s inými molekulárnymi metódami. Preto dokáže v testovanom biologickom materiáli odhaliť aj malý počet častíc koronavírusu.
Samozrejme, na získanie čo najspoľahlivejších výsledkov sa počas samotného testu RT-PCR v reálnom čase používa množstvo interných kontrol: pozitívne, čo je vírusová RNA, a negatívne, čo je zvyčajne voda.
Je dôležité vedieť, že limitom molekulárnych metód je možnosť získania falošne negatívnych výsledkov, čo môže byť spôsobené nesprávnou metódou odberu vzoriek alebo nesprávnym časom odberu vzoriek.
Na molekulárne testovanie u asymptomatických ľudí sa zvyčajne odoberá materiál z horných dýchacích ciest, napríklad výter z nosohltanu, v ktorom sa počet častíc koronavírusu v priebehu času po infekcii postupne znižuje.
Materiál získaný z dolných dýchacích ciest, ako je spútum, alveolárna-bronchiálna tekutina (BAL) alebo bronchoaspirát, je najvhodnejší, hoci sa zvyčajne získava od ľudí s vážnymi príznakmi infekcie koronavírusom.
Na záver, molekulárne testy sú v súčasnosti jediné, ktoré Svetová zdravotnícka organizácia odporúča na potvrdenie aktívnej infekcie koronavírusom SARS-CoV-2. Molekulárne testy však nedajú odpoveď na otázku, či sa už človek nakazil. Je to možné vďaka imunologickým testom.
Testy na koronavírus – Imunotest
Imunoanalýza na koronavírus meria prítomnosť imunitných proteínov (protilátok) produkovaných imunitným systémom pacienta po vystavení vírusu alebo prítomnosť proteínov (antigénov) koronavírusu v krvi alebo biologickom materiáli odobratom z horných dýchacích ciest.
Aby sme pochopili, čo imunitné testy detegujú, je dôležité vedieť, ako funguje ľudská imunitná odpoveď. Keď koronavírus vstúpi do tela, aktivuje sabunky produkujúce proti nemu protilátky v triede M (IgM). Potom sa v priebehu času protilátky IgM postupne nahrádzajú protilátkami triedy G (IgG). Okrem toho telo produkuje protilátky triedy A (IgA), ktoré možno použiť aj pri diagnostike koronavírusu SARS-CoV-2. Ide o protilátky, ktoré sú dôležité predovšetkým vtedy, ak sa merajú v sekrétoch dýchacích ciest, pretože tam ich telo produkuje najviac.
Stojí za zmienku, že čas objavenia sa jednotlivých protilátok sa u rôznych patogénov líši. V prípade infekcie koronavírusom SARS-CoV-2 je táto doba približne 2 týždne. A to je jedno z najväčších obmedzení imunologického výskumu.
Od okamihu infekcie koronavírusom až po produkciu špecifických protilátok (približne 2 týždne) môžu chýbať alebo sú príliš nízke na to, aby sa dali zistiť laboratórnym testom. V tejto situácii máme falošne negatívny výsledok, t. j. osoba je infikovaná koronavírusom, ale test ukazuje negatívny výsledok. Takéto výsledky možno získať aj u jedincov s imunodeficienciou, ktorých mechanizmus tvorby protilátok je narušený.
V diagnostických laboratóriách sa na detekciu IgM, IgA a IgG protilátok proti koronavírusu, prípadne jeho antigénom používajú imunoenzymatické, imunochemické a imunoblotovacie metódy
Výraznou výhodou imunoanalýzy oproti molekulárnym metódam je to, že dokážu identifikovať ľudí, ktorí boli predtým infikovaní koronavírusom SARS-CoV-2, dokonca aj tých, ktorí boli infikovaní asymptomaticky.
Nevýhodou koronavírusových imunotestov je však riziko získania falošne pozitívnych výsledkov, t. j. osoba nie je infikovaná koronavírusom, ale test ukazuje pozitívny výsledok. Takáto situácia môže nastať napríklad u ľudí, ktorí sú infikovaní inými vírusmi z rodiny koronavírusov.
Stručne povedané, sérologické testy zisťujúce protilátky proti koronavírusu SARS-CoV-2 môžu pomôcť pri diagnostike infikovaných ľudí, ale nepoužívajú sa na potvrdenie aktívnych prípadov infekcií koronavírusom. Imunotesty môžu byť užitočné pre epidemiologický dohľad na identifikáciu ľudí, ktorí mali v minulosti infekciu koronavírusom.
Testy na koronavírus – rýchle diagnostické testy
V reakcii na pandémiu COVID-19 a potrebu rýchlej diagnostiky nakazených ľudí a obmedzenú kapacitu diagnostických laboratórií sa začali realizovať testy na tzv. rýchla diagnostika koronavírusu, t.j. kazetové testy. Kazetové testy sú založené na princípe podobnom princípu fungovania testovtehotenstva, ktorý si môžete kúpiť v lekárni a použiť imunochromatografické metódy.
Na ich vykonanie potrebujete odobrať malé množstvo krvi z vášho prsta. Veľkou výhodou týchto testov je možnosť vykonania testu mimo laboratória a získanie výsledku po niekoľkých až desiatkach minút
Tieto testy sú v skutočnosti druhom imunotestu, pretože testujú prítomnosť proteínov (antigénov) koronavírusu vo vzorke odobratej z dýchacieho traktu alebo prítomnosť protilátok vytvorených proti vírusu v krvi. Aby však takýto test poskytol spoľahlivé výsledky, vyžaduje si primeranú validáciu, t. j. potvrdenie jeho dôveryhodnosti.
Zle zvolené rýchle diagnostické testy nemusia odhaliť infikovaných ľudí (falošne negatívne výsledky) alebo poskytnúť falošne pozitívne výsledky u zdravých ľudí.
Na základe aktuálnych údajov Svetová zdravotnícka organizácia neodporúča používanie rýchlych diagnostických testov na zisťovanie protilátok v starostlivosti o pacientov, vzhľadom na stále slabé vedecké dôkazy. Podporuje však pokračovanie výskumnej práce s cieľom určiť ich vhodnosť na monitorovanie infekcií a epidemiologické štúdie.
Testy na koronavírus – ako vyzerá zber výskumného materiálu?
Na získanie spoľahlivého výsledku testu na koronavírus je veľmi dôležité zozbierať vhodný biologický materiál na testovanie. Odber na molekulárne testovanie zahŕňa získanie tampónu z nosohltanu alebo hrdla so špeciálnym tampónom.
Výskum nie je veľmi príjemný pre človeka, od ktorého sa materiál zbiera. V niektorých prípadoch môžu byť alternatívnou voľbou vzorky z dolných dýchacích ciest, ako je spútum alebo BAL tekutina.
Pri odbere vzorky z nosohltanovej dutiny osoba, ktorá odoberá tampón, vloží tampón hlboko cez nos pacienta a niekoľkokrát ním niekoľko sekúnd otáča. Zákrok sa vykonáva v oboch nosových dierkach.
Na druhej strane, ak sa vzorka odoberá súčasne z hrdla a sliznice nosa, tampón sa najskôr vloží hlboko do hrdla. Potom ho zbierajúci niekoľkokrát otočí a potrie o povrch sliznice hltanu. Potom sa tampón vloží do oboch nosných dierok. Venózna krv sa odoberá z ohybu lakťa na imunologické testy.
Testy na koronavírus – kto by mal test robiť?
- ľudia s príznakmi podobnými chrípke, ako je vysoká horúčka, pretrvávajúci kašeľ, dýchavičnosť
- ľudí, ktorí cestovali do oblastí s vysokým výskytom COVID-19
- osoba, ktorá mala blízky kontakt s nájdenou osobouInfekcia koronavírusom SARS-CoV-2
- osoba, ktorá pracuje alebo navštevuje zdravotnícke zariadenie, kde sa liečia ľudia infikovaní koronavírusom
Testy na koronavírus – ako interpretovať výsledky imunologických testov?
- vysoká koncentrácia IgM (alebo IgA) a IgG protilátok - pravdepodobne aktívna infekcia koronavírusom, tiež asymptomatická. V tomto prípade je potrebné konzultovať s lekárom molekulárne potvrdenie.
- vysoká koncentrácia IgM (alebo IgA) a nízka koncentrácia IgG - pravdepodobne aktívna infekcia koronavírusom, tiež asymptomatická. V tomto prípade je potrebné konzultovať s lekárom molekulárne potvrdenie.
- nízka koncentrácia IgM (alebo IgA) a vysoká koncentrácia IgG – pravdepodobne infekcia koronavírusom v anamnéze
- nízka koncentrácia IgM (alebo IgA) a koncentrácia IgG – pravdepodobne bez infekcie alebo kontaktu s koronavírusom. Negatívny výsledok imunotestu však nevylučuje aktívnu infekciu.
Testy na koronavírus – ako interpretovať výsledky molekulárnych testov?
- negatívne – v testovanom materiáli nebol zistený koronavírus SARS-CoV-2. Neznamená to žiadnu infekciu koronavírusom, ale pozor, ani jeden negatívny výsledok testu nevylučuje infekciu koronavírusom, najmä u vysoko exponovaných ľudí, ak sa test vykonáva výterom z nosohltanu a na začiatku infekcie. V tomto prípade môže byť vhodné zopakovať test alebo odobrať hlbšiu vzorku dýchacích ciest, ako je BAL.
- undiagnostic - znamená, že vzorka nie je vhodná na testovanie a treba odobrať inú vzorku
- nepresvedčivé / nepresvedčivé - znamená to, že výsledok je na hranici analytickej citlivosti testu a vyžaduje si ďalšiu vzorku po 24-48 hodinách
- pozitívny - V testovanom materiáli bol zistený koronavírus SARS-CoV-2. To znamená aktívnu infekciu koronavírusom a vyžaduje si okamžitý kontakt s hygienickou a epidemiologickou stanicou
Testy na koronavírus – kde sa to dá urobiť?
Ľudia podozriví z nákazy koronavírusom by sa mali hlásiť na najbližšej hygienickej a epidemiologickej stanici, kde budú informovaní, kde im budú môcť vykonať refundovaný molekulárny test na koronavírus.
Okrem toho ministerstvo zdravotníctva postupne aktualizuje zoznam laboratórií, kde sa robia testy na koronavírus: zoznam laboratórií COVID
Za poplatok je možné vykonať molekulárne, imunologické a kazetové testy v komerčných laboratóriách
- Ako si umývať ruky?
- Antibakteriálne gély a tekutiny – chránia?proti vírusu SARS-CoV-2?